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搞定植物elisa試劑盒標(biāo)本的方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-06-11 09:24:36  瀏覽次數(shù):25
核心提示:標(biāo)本保存,在植物elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中是非常重要的,常有elisa操作員反映在標(biāo)本保存時(shí)出現(xiàn)溶血、凝集不全、受細(xì)菌污染等現(xiàn)象發(fā)生,我公司技術(shù)員特針對(duì)相關(guān)常見問題做出總結(jié)。一、標(biāo)本保存不當(dāng)在冰
搞定植物elisa試劑盒標(biāo)本的方法 標(biāo)本保存,在植物elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中是非常重要的,常有elisa操作員反映在標(biāo)本保存時(shí)出現(xiàn)溶血、凝集不全、受細(xì)菌污染等現(xiàn)象發(fā)生,我公司技術(shù)員特針對(duì)相關(guān)常見問題做出總結(jié)。

一、標(biāo)本保存不當(dāng)

在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法elisa測定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時(shí)間過長(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。

為克服上述干擾,elisa測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。

二、標(biāo)本溶血

由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,植物elisa試劑盒干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。

三、標(biāo)本凝集不全

在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h完全凝固。臨床檢驗(yàn)工作中,有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測,常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在elisa測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果。

這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已完全,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>

做好了植物elisa試劑盒因素和操作因素之后,確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性就容易的多了。

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